Agar PDA e MEA - Preparo de placas de Petri esterilizadas e uso de panela de pressão como autoclave

Apresentamos um método para se preparar o Ágar Batata Dextrose (BDA) e o Ágar Extrato de Malte (MEA) e sua esterilização em panela de pressão utilizada como autoclave. 0:00 Introdução 0:38 Ágar BDA 6:03 Frasco reagente 4:26 Ágar MEA 8:20 Rolha p/ Erlenmeyer 8:44 Preparo de placas de Petri 9:56 Teste químico e biológico p/ autoclave 11:16 Panela de pressão como autoclave 14:47 Resultados da esterilização 16:18 Solificação e refundir o ágar 17:48 Preparo do ambiente 18:38 Proteção com chama 19:15 Deposição do ágar em placa estéril 21:26 Culturas obtidas Metodologia 200 mL de ágar BDA: 0,8 g de fécula de batata; 4 g de glicose em pó (ou 4,5 g de glicose "líquida"); 3 g de ágar de boa qualidade; 200 mL de água tratada (preferencialmente destilada); Adicionar os componentes sólidos e acrescentar a água, agitar até a homogeneização e aquecer brandamente até 85-95°C até que o ágar seja fundido. Pode-se deixar para que o ágar seja fundido durante a autoclavagem. Nesse último caso, após a autoclavagem devem homogeneizar a mistura. PS: Pode-se substituir a água e a fécula de batata por 200 mL de infusão de batatas (infusão de 40 g de batatas para cada 200 mL de água); 200 mL de DME: 6 g de Extrato de malte seco - (Preferencialmente DME, tipo "light") 4 g de ágar para Kanten de boa qualidade; 200 mL de água tratada (preferencialmente destilada); Adicionar os componentes sólidos e acrescentar a água, agitar até a homogeneização e aquecer brandamente até 85-95°C até que o ágar seja fundido. Pode-se deixar para que o ágar seja fundido durante a autoclavagem. Nesse último caso, após a autoclavagem devem homogeneizar a mistura. Sugerimos a esterilização em panela de pressão por 60 minutos, pois esse tempo mostrou-se suficiente para a inativação de esporos do micro-organismo Geobacillus stearothermophilus. Se uma quantidade muito grande de material necessitar de esterilização, recomendamos 90 minutos de autoclavagem. É importante lembrar que deve-se colocar água suficiente na panela de pressão para que haja vapor durante todo esse tempo. O uso da chama de um bico de Bünsen permite a criação de uma área segura muito maior do que o de uma lamparina. A capela de fluxo laminar para evitar contaminações do material esterilizado pelo ambiente é muito mais eficiente e de manipulação mais fácil do que a proteção por chama. Músicas: Journey in the New World de Twin Musicom está licenciada sob uma licença Creative Commons Attribution Origem: http://www.twinmusicom.org/song/258/j... Artista: http://www.twinmusicom.org Referências 1. BACTERIOLOGICAL ANALYTICAL MANUAL, 8th Edition, Revision A, 1998. BAM Media M127: Potato Dextrose Agar. Disponível em: https://www.fda.gov/food/laboratory-m... 2. COMMITTEE ON BACTERIOLOGICAL TECHNIC. Manual of microbiological methods by American Society for Microbiology. New York: McGraw-Hill Book Company, Inc, 1957. 315 p. 3. GUTZ, Herbert; DOE, Frank J. TWO DIFFERENT h - MATING TYPES IN SCHIZOSACCHAROMYCES POMBE. Genetics, [S.L.], v. 74, n. 4, p. 563-569, 1 ago. 1973. Oxford University Press (OUP). http://dx.doi.org/10.1093/genetics/74.... 4. BACTERIOLOGICAL ANALYTICAL MANUAL, 8th Edition, Revision A, 1998. BAM Media M93: Malt Extract Agar. Disponível em: https://www.fda.gov/food/laboratory-m... 5. ATKINS, Peter; PAULA, Julio de. Físico-química: vol. 1. 9. ed. Rio de Janeiro: LTC, 2013. 416 p. Tradução e revisão técnica Edilson Clemente da Silva, Márcio José Estillac de Mello Cardoso, Oswaldo Esteves Barcia. 6. Manual do teste biológico Maquira, disponível em: https://maquira.com.br/wp-content/upl... 7. WHITMAN, David A.; READ, David M.; PARTHASARATHY, Ranjani V.; LANDGREBE, Kevin D.; BENNETT, Anthony E.. CHEMICAL INDICATOR COMPOSITIONS, INDICATORS AND METHODS. Depositante: 3M Innovative Properties Company. US n. 2011/0312096 A1. Depósito: 15 jun. 2011. Concessão: 22 dez. 2011. Disponível em: https://www.freepatentsonline.com/RE3... 8. FOLEY, Theodore A. STEAM STERILIZATION INDICATOR. Depositante: Pymah Corporation. Procurador: Robert H. Falk e Tom R. Vestal. US n. 34,515. Depósito: 24 dez. 1991. Concessão: 18 jan. 1994. Reedição da patente US 4,448,548. Disponível em: https://www.freepatentsonline.com/201... 9. WHITE, Chris; ZAINASHEFF, Jamil. Yeast: the practical guide to beer fermentation. Boulder: Brewers Publications, 2010. 304 p. 10. PETRI, Julius Richard. Eine kleine Modification des Koch'schen Plattenverfahrens. Centralblatt Für Bakteriologie Und Parasitenkunde, Berlin, v. 1, p. 279-280, fev. 1887. Disponível em: https://www.biodiversitylibrary.org/i... 11. VERMELHO, Alane Beatriz; PEREIRA, Antônio; COELHO, Rosalie; SOUTO-PADRÓN, Thaïs. Práticas de microbiologia. 2. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2019. 256 p. #Comunidadequimica #Microbiologia #AgarBDA