Эпизод 6: Изготовление красителей для наблюдения за растительными клетками

Биологические красители, такие как толуидиновый синий O (ТБО) и йодид калия (I2KI), позволяют визуализировать особенности растительных клеток под микроскопом. В этом видео показано, как приготовить эти два распространенных красителя. Полные инструкции приведены ниже (нажмите «показать больше»). ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ТБО: 1. Исходные растворы для приготовления толуидинового синего O Приготовим 100 мл исходных растворов 0,1 М лимонной кислоты (раствор «А») и 0,1 М цитрата натрия (раствор «В»). Подробные инструкции ниже. А. Для приготовления 100 мл 0,1 М лимонной кислоты: • Растворите 1,921 г лимонной кислоты в стакане, содержащем около 80 мл дистиллированной воды (дистиллированной воды), на магнитной мешалке. • Перелейте раствор в мерную колбу объемом 100 мл и доведите объем до 100 мл дистиллированной водой. 2. Шаг 1. Приготовление 100 мл 0,1 М цитрата натрия: • Растворите 2,941 г цитрата натрия в стакане, содержащем около 80 мл дистиллированной воды, на магнитной мешалке. • Перелейте раствор в мерную колбу объемом 100 мл и доведите объем до 100 мл дистиллированной водой. 2. Следующий шаг: Приготовление цитратного буфера Для приготовления цитратного буфера с pH 4,0 используйте 25,5 мл раствора «А» (0,1 М лимонной кислоты) и 24,5 мл раствора «В» (0,1 М цитрата натрия), доведите объем до 100 мл дистиллированной водой. Отрегулируйте pH до 4,0, добавив по каплям 1N HCl (разбавленный раствор соляной кислоты). 3. Заключительный этап: Приготовление толуидинового синего O Растворите 50 мг толуидинового синего O в 100 мл цитратного буфера (из предыдущего шага 2). Примечание: Если требуется больший объем толуидинового синего O, просто увеличьте объемы/массу в шагах 2 и 3 соответственно. ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ I2KI: Окрашивание йодидом калия (I2KI) Приготовим 100 мл этого красителя (рецепт удвоен в видео). Подробные инструкции ниже. 1. Растворите 2 г йодида калия (KI) в 100 мл дистиллированной воды (dH2O). 2. Растворите 0,2 г йода в растворе KI (из шага 1 выше), используя магнитную мешалку. Это займет от нескольких минут до нескольких часов, в зависимости от объемов и масс, скорости перемешивания и других факторов. Планируйте соответственно. Внимание: Обращайтесь с йодом осторожно и не вдыхайте пары йода. Примечания: Храните в защищенном от света месте в стеклянном флаконе-капельнице из темного стекла или завернутым в алюминиевую фольгу. Замените неиспользованный раствор через год, так как со временем его эффективность снижается. ССЫЛКИ Рецепты окрашивания основаны на рецептах, опубликованных в: Peterson, R.L., Peterson, C.A., and Melville, L.H. 2008. Teaching plant anatomy through creative laboratory exercises. NRC Press, Ottawa, Ontario. 164 pp.