Транспозон PiggyBAC: создание трансгенных мышей со стабильной экспрессией генов

В последнем видео, которое вы можете найти здесь (   • The Basics of Transgenic Mice: Pronuclear ...  ), мы говорили о том, что такое трансгенные мыши и как их разрабатывают ученые с помощью традиционной пронуклеарной инъекции. Однако у метода пронуклеарной инъекции для создания трансгенных животных есть некоторые ограничения. Для получения трансгенных мышей ученые должны ввести трансген во множество зигот, прежде чем имплантировать их в суррогатную мать. Хотя большинство из них погибнет, каждая из них обладает потенциалом превратиться в свою собственную трансгенную мышь. При традиционной пронуклеарной инъекции каждая из этих зигот подвергается совершенно случайной интеграции трансгена. Это приводит к большому разнообразию уровня экспрессии у потомства. Это здорово, не правда ли? Мы должны получить высокую экспрессию трансгена у отдельных особей, потому что интегрировано так много копий. Ну, не совсем. В некоторых локусах эти тандемные повторы могут усиливать экспрессию целевого гена, в то время как в других тандемная интеграция подавляет экспрессию самого гена. Различные места интеграции трансгена на хромосоме также могут играть роль в объяснении изменчивости экспрессии гена. Подобно тому, как случайная интеграция означает случайное количество копий, она также означает случайное местоположение. Если ДНК интегрируется в область закрытого хроматина, это приведет к более низкой частоте экспрессии, чем если бы она интегрировалась в другие, более открытые участки хромосомы. По этой причине ученые уже более десяти лет используют транспозон Piggyback для создания трансгенных мышей с интеграцией одной копии в области открытого хроматина. При традиционном подходе к созданию трансгенных мышей тандемная интеграция часто приводит к различным уровням экспрессии гена. У некоторых особей наблюдается средняя экспрессия, а у некоторых — ее полное отсутствие. Использование транспозона Piggyback для создания трансгенных мышей приводит к высокой и стабильной экспрессии трансгена у всех особей F1. Посмотрите это видео, чтобы узнать, как интеграция в открытый сайт TTAA, хроматин, приводит к более высокой и стабильной экспрессии. Используйте код watch-T в вашем запросе на любые наши услуги по созданию трансгенных мышей, который можно найти здесь, со скидкой 15% в течение ограниченного времени: https://www.cyagen.com/us/en/services... В большинстве экспериментов ученые стараются минимизировать количество независимых переменных, чтобы не искажать результаты эксперимента. Если уровень экспрессии гена не является переменной, которую ученый надеется изучить, использование потомства трансгенной мыши, созданной с помощью традиционной пронуклеарной инъекции, может быть не лучшим вариантом. Некоторые изображения в этом видео были созданы с помощью Biorender. Источники: Handler, A. M., McCombs, S. D., Fraser, M. J., & Saul, S. H. (июнь 1998 г.). Вектор транспозона чешуекрылых piggyBac опосредует трансформацию зародышевой линии у средиземноморской плодовой мухи. Труды Национальной академии наук. doi:10.1073/pnas.95.13.7520 Ланц, Н. (Режиссер). (2018, 11 октября). Введение в транспозоны [Видеофайл]. Получено 5 февраля 2021 г. с    • Introduction to Transposons   Трансгенные мыши PiggyBac. (без даты). Получено 9 февраля 2021 г. с https://www.cyagen.com/us/en/service/... Система транспозона Piggybac. (2020, 24 февраля). Получено 9 февраля 2021 г. с https://www.herabiolabs.com/piggybac-... Рюлике, Т., и Хюбшер, У. (2004 г., 5 мая). Трансформация зародышевой линии млекопитающих с помощью микроинъекции пронуклеусов. Получено 9 февраля 2021 г. с https://physoc.onlinelibrary.wiley.co... Вудард, Л. (Режиссер). (2019 г., 4 декабря). Транспозоны PiggyBac для вырезания и вставки ДНК [Видеофайл]. Получено 5 февраля 2021 г. с https://www.youtube.com/watch?reload=... Чжао, С., Цзян, Э., Чен, С., Гу, Ю., Шангуань, А. Дж., Лю, Т., ... Ю, З. (2016). Векторы транспозонов PiggyBac: инструменты кодирования генов человека. Трансляционные исследования рака легких, 120-125. doi:10.3978/j.issn.2218-6751.2016.01.05 Cyagen, модели крыс и мышей на заказ, сайты TTAA, TTAA, трансгенные мыши, трансгенные животные, информация о piggyBAC, PiggyBAC, Piggy BAC, транспозосома, транспозоны, метод на основе транспозонов, транспозоны для генетических модификаций, мыши с транспозонами, мыши, генетически модифицированные мыши, транспозаза, открытый хроматин, трансгенные животные с высокой экспрессией, трансгенные мыши с постоянной экспрессией, интеграция одной копии, Taconic, Biocytogen, genoway, Jackson laboratories, appliedstemcell