Ионообменная хроматография

Ионообменная хроматография основана на явлении притяжения между противоположными зарядами. Стационарная фаза выбирается таким образом, чтобы она имела определенный заряд и притягивала молекулы образца с противоположным зарядом. Стационарная фаза также называется ионообменником. Ионообменники могут быть двух типов: катионообменники и анионообменники. Катионообменник имеет отрицательный заряд и притягивает положительно заряженные катионы, тогда как анионообменник имеет положительный заряд и притягивает отрицательно заряженные анионы. Для разделения белков необходимо проверить, при каком pH белок стабилен. Если белок стабилен при pH на одну единицу выше изоэлектрического pH, то предпочтительнее использовать анионообменную хроматографию, поскольку белок будет иметь отрицательный заряд. А если белок стабилен при pH на одну единицу ниже изоэлектрического pH, то предпочтительнее использовать катионообменную хроматографию, поскольку белок будет иметь положительный заряд. После связывания белка со стационарной фазой в колонке элюция белка может быть осуществлена ​​изменением pH или изменением ионной силы.