Аффинная хроматография

Аффинная хроматография — это хроматографический метод, в котором разделение происходит на основе специфического взаимодействия между двумя молекулами. Это специфическое взаимодействие может происходить между ферментом и субстратом, рецептором и лигандом, белком и нуклеиновой кислотой и т.д. Аффинная хроматография обычно проводится в колонке, заполненной носителем или матрицей. Используемая матрица должна быть химически инертной, обладать хорошей текучестью и иметь достаточное количество функциональных групп для ковалентного связывания лиганда. Матрица крепится с помощью спейсера, обычно состоящего из группы CH2. Наличие спейсера предотвращает неспецифическое взаимодействие лиганда с самой матрицей. При пропускании смеси различных молекул через аффинную колонку только молекула, имеющая специфическое сродство к лиганду, связывается с лигандом. Остальные молекулы вымываются. Затем для диссоциации интересующей молекулы от лиганда пропускают буфер с другой ионной силой pH. Это в конечном итоге освобождает интересующую молекулу от лиганда и позволяет получить чистый продукт.