U1T3 : Bibliotecas de DNA e cDNA: Clonagem em Massa e Transcriptase Reversa | Aula Magna
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U1T3 : Bibliotecas de DNA e cDNA: Clonagem em Massa e Transcriptase Reversa | Aula Magna
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Explore como a Biologia Molecular armazena, mapeia e cataloga a totalidade das sequências gênicas através das Bibliotecas de DNA Genômico e de cDNA! Conteúdo direcionado a estudantes e profissionais de Biomedicina, Farmácia, Medicina e Biotecnologia.
Tópicos abordados nesta aula:
O Desafio da Complexidade Genômica: Estrutura do genoma eucarioto humano e a necessidade de fracionamento para estudo.
Construção de Bibliotecas Genômicas: Digestão enzimática do DNA total, inserção em vetores de clonagem e empacotamento.
Clones Bacterianos: Manutenção e estocagem de milhões de clones em placas de cultura e microplacas congeladas.
Rastreamento por Hibridização em Colônia: Transferência para membranas de náilon/nitrocelulose e anelamento com sondas marcadas.
O Desafio dos Íntrons: A limitação do DNA genômico humano com regiões não codificantes e splicing ausente em bactérias.
Biblioteca de cDNA (DNA Complementar): Uso de mRNA maduro como molde e purificação seletiva por cauda poli-A.
Mecanismo da Transcriptase Reversa: Síntese de primeira fita de cDNA a partir de retrovírus e formação de fita dupla funcional.
Biblioteca Genômica vs. Biblioteca de cDNA: Diferenças em cobertura informacional, expressão funcional e tamanho de inserção.
Engenharia Genética e Produção de Biofármacos: Síntese heteróloga de proteínas recombinantes, vacinas e terapias gênicas.
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Produção e Conteúdo: Anderson Leandro Kovalski
Website: https://Integrativia.com.br